Kapiliarinės elektroforezės ir reakcijos detekcijos sujungimas nustatant tiesioginį radikalų surišimo aktyvumą

Anotacija

Cheminiai antioksidacinio aktyvumo tyrimai gali būti grįsti skirstymo ir neskirstymo metodais. Neskirstymo metodais paremtais antioksidacinio aktyvumo tyrimais galima įvertinti antioksidantų gebėjimą mišinyje surišti laisvuosius radikalus. Šie metodai yra kiekybiniai ir nesuteikia informacijos apie atskirų komponentų antioksidacines savybes. Skirstymo metodai, sujungti su cheminiais antioksidacinio aktyvumo metodais, suteikia galimybę ištirti sudėtingose gamtinėse matricose esančių atskirų antioksidantų gebėjimą surišti laisvuosius radikalus ir pasižymi dideliu atrankumu. Kapiliarinė elektroforezė yra efektyvus mikrometodas, pagrįstas analičių atskyrimu pagal jų masės ir krūvio santykį per trumpą laiką. Kapiliarinės elektroforezės, sujungtos su laisvojo radikalo surišimo reakcijos detekcija, metodas gali būti panaudotas antioksidantų analizei ir radikalų surišimo aktyvumui įvertinti. Šio darbo metu sukurta kapiliarinės elektroforezės ir reakcijos detektoriaus sąsaja, panaudojus cheminės analizės laboratorijoje esančius įprastus chromatografinius komponentus. Sukurtos dvi sąsajos modifikacijos. Pirmojoje modifikacijoje (I) įžemintas elektrodas patalpintas reagento inde, uždarant elektros grandinę prieš reakcijos detektorių. Šiuo atveju tėkmė reakcijos kilpoje buvo dėl hidrostatinio slėgio, susidariusio dėl aukščio skirtumo reakcijos kilpos galuose. Antroji sąsajos modifikacija (II) sukurta įžeminus buferio indą, esantį už reakcijos detektoriaus. Tokiu atveju tėkmę generavo iš kapiliarinės elektroforezės aparato tiekiamas slėgis ir aukštos įtampos sukeltas elektroosmozinis srautas. Metodo sąlygoms optimizuoti siekiant efektyvaus darbinio elektrolito ir reagento sumaišymo išbandytos skirtingos slėgio ir įtampos reikšmės. Kapiliarinės elektroforezės su reakcijos detekcija metodas pademonstravo gerą tiesiškumą: kapiliarinės elektroforezės UV detekcijos ir reakcijos detekcijos regresijos koeficientas (R2) buvo atitinkamai 0,996 ir 0,993. Metodo pakartojamumas išreikštas santykiniu standartiniu nuokrypiu kapiliarinei elektroforezei ir reakcijos detekcijai – atitinkamai 3,21 ir 5,87 %.