Determination of coumestrol in lucerne by ultra-high pressure liquid chromatography–mass spectrometry

Abstract

Ultraefektyvioji skysčių chromatografija su MS detektoriumi pritaikyta kumestroliui nustatyti Lietuvoje auginamuose liucernos augaluose (Medicago sativa ir Medicago lupulina). Kumestrolis buvo ekstrahuojamas 2 mol/L HCl parūgštintu metanolio / vandens (8:2, v/v) tirpalu. Chromatografinis atskyrimas atliktas Acquity BEH C18 kolonėlėje naudojant gradientinę eliuciją metanolio / vandens judria faze su 0,25 % (v/v) acto rūgšties priedu. MS detektuoti naudotas pasirinktų jonų monitoringo režimas ir neigiamų jonų elektropurkštuvinė jonizacija. Išmatuota kalibracinė kreivė tiesinė 0,05–5,00 mg/L kumestrolio koncentracijų intervale. Aptikimo ir nustatymo ribos atitinkamai lygios 0,015 ir 0,05 mg/L. Kumestrolio standartinių priedų išgavos iš liucernos mėginių siekia 88,5–96,1 %, o santykiniai standartiniai nuokrypiai – 4,5–7,2 %.